elisa关键工艺實驗情况和工艺难点
2011-06-07
在用ELISA时，第一要明了现在主要内容：
1，是加测抗原还是要抗原?
2，检测工具的然而是相关性还得参考值?
3，有没有需用测量特异抗体阳性的类别?
4，用到表面抗原/单克隆表面抗原的判断力这样?
(1)监测抗原
最喜欢用到加测抗原的手段是角逐性的双抗体阳性夹心法，而后是角逐法。但角逐法在具有研究有些困难重重，有点是加测分子生物学制品的抗原，会因为必须要图标抗原，这这对于某个抗可称太难坐到的，或者就是不将会的。其他在角逐法中，酶图标的抗原与样本可以直接混后在一块去，一些样本中富含酶调节剂或淀粉酶A样材料，可干扰ELISA的后果。
(2)检查抗体阳性
测试工具免疫抗原类型经通常用到的手段是测试工具免疫抗原类型的捕捉法，此手段经通常用到于测试工具非特异聊天IgG、IgA和IgM.。此手段的第二步是捕捉需用要测试工具的其中一个类型的免疫抗原，下面来是测试工具捕捉的免疫抗原有没有是非特异聊天抗原的免疫抗原。隐性ELISA在测试工具IgG时更简约，但不适用性于测试工具的类型的免疫抗原，而是血清中倘若有特异IgG存在着将与IgM或IgA等恶性竞争结合起来抗原。
竟争法判断表面抗原有两类具体方法：属于是将标示图片的表面抗原和生物样本还加进响应孔内，但标示图片的表面抗原和生物样本中的表面抗原需要是根据抗原的有所不同关键簇;另属于是先加生物样本，冲刷后多加标示图片的表面抗原。
竞争激烈法验测抗原比外源法非常容易答案然而，以及十分敏感脆弱和特异。
不问决定哪几种方式，ELISA都主要包括6个步驟：
1，抗原或抵抗能力粘附于固相;2.加标本采集和采血管;3，孵育和冲刷;4，加酶标抗原或抵抗能力;5，加非常合适的底物;6，检查和概述没想到。
